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電泳儀原理

2023-07-21 08:35:02 Vink 111

電泳儀原理:

電泳儀的基本原理是利用電場(chǎng)將帶電粒子在凝膠或緩沖液中移動(dòng),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)粒子的分離和分析。其主要原理包括如下幾個(gè)方面:


1. 帶電粒子遷移:在電場(chǎng)作用下,帶電粒子在溶液中會(huì)受到電場(chǎng)力的作用,從而向著電極方向移動(dòng)。粒子的遷移速度取決于其電荷大小、形狀和大小。


2. 凝膠/緩沖液媒介:電泳儀通常使用凝膠或緩沖液作為粒子遷移介質(zhì)。凝膠可以是聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠或硅膠等,而緩沖液則提供所需的離子濃度和pH值,幫助帶電粒子的遷移。


3. 分離效果:帶電粒子根據(jù)其電荷和大小的不同,在凝膠或緩沖液中遷移的速度會(huì)有所差異,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)粒子的分離。較小的粒子會(huì)移動(dòng)得更快,而較大的粒子則移動(dòng)得更慢。


4. 染色檢測(cè):分離完成后,可以通過(guò)染色或其他化學(xué)反應(yīng)對(duì)目標(biāo)粒子進(jìn)行可視化。常用的染色方法包括乙溴化乙鋪、銀染等。


電泳儀使用方法:

以下是電泳儀的基本使用方法,具體步驟可能會(huì)因儀器型號(hào)和實(shí)驗(yàn)需求而略有區(qū)別:


1. 準(zhǔn)備樣品:將待分析的樣品溶解在緩沖液中,并加入必要的標(biāo)記物或標(biāo)記劑。


2. 準(zhǔn)備凝膠:根據(jù)需要選擇適當(dāng)?shù)哪z類(lèi)型,如聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠,并根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求制備好凝膠。


3. 設(shè)置電泳槽:將凝膠放置在電泳槽中的槽槽緩沖液中,確保凝膠完全浸泡。


4. 載樣:使用載樣架將樣品裝填到凝膠中的樣品槽中。注意避免氣泡的產(chǎn)生。


5. 連接電源:將電泳槽兩端的電極連接到電源上,并確保電極與凝膠接觸良好。


6. 施加電壓:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)置合適的電壓,并將電源打開(kāi),施加電場(chǎng)使電泳開(kāi)始。


7. 分離過(guò)程的監(jiān)控:根據(jù)需要,可以使用透射式紫外線燈或其他檢測(cè)裝置來(lái)實(shí)時(shí)觀察凝膠中的帶電粒子遷移情況。


8. 手動(dòng)或自動(dòng)結(jié)束電泳:當(dāng)帶電粒子達(dá)到所需分離程度時(shí),可以手動(dòng)關(guān)閉電源,或者根據(jù)儀器設(shè)置的自動(dòng)終止條件來(lái)結(jié)束電泳。


9. 染色和可視化:分離完成后,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求對(duì)目標(biāo)粒子進(jìn)行染色或其他化學(xué)反應(yīng),并使用所需檢測(cè)裝置進(jìn)行結(jié)果觀察和記錄。


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